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    qEV高純度外泌體尺寸排阻SEC分離柱

           
            qEV是一種根據尺寸排阻原理SEC(Size exclusion Chromatography)設計的細胞外囊泡(外泌體)分離-純化技術,由新西蘭Izon公司研發和生產。qEV可以從細胞培養上清液或復雜生物體液中快速、簡便、無損地提取細胞外囊泡(外泌體),無需復雜的前處理和試劑準備。

            qEV技術有效避免了超速離心和密度梯度離心等傳統方法分離囊泡(外泌體)時,由于超高離心力與蔗糖溶液高粘性造成的HDL蛋白或囊泡的聚集污染,也避免了傳統方法對于囊泡(外泌體)的膜結構的損傷,使其保留完整的生物活性。

    qEV產品優勢


    1. 快速提取(僅需約 15 分鐘);

    2. 污染背景蛋白去除率>99%;

    3. 高密度脂蛋白(HDL)去除率>95% ;
    4. 保持細胞外囊泡的完整性和生物功能;
    5. 可分離指定粒徑大小的外泌體;

    6. 按照ISO13485質量標準制造;

    7. 尤其適用于外泌體功能研究中,用于細胞培養或動物注射的高純度外泌體的獲得;
    8.  適用于多種類型樣品的外泌體提取,包括:血清、血漿、尿液、細胞上清、腦脊液、唾液、房水、宮腔灌洗液、腹水、胸水、膽汁、蜂王漿、牛奶等。



    qEV.png

    qEV工作原理

           
            qEV是采用尺寸排阻SEC原理按照分子粒徑進行分段分離的方法。基本原理如圖1所示,將生物樣品流經具有固定孔隙的SEC填充物,吸附粒徑較小的分子如蛋白脂類等,而較大粒徑的分子或顆粒不能進入孔隙。在緩沖液的作用下,較大粒徑的囊泡(外泌體)流速快,在特定的階段會被洗脫出來進入樣品收集管,成為實驗樣品。而小分子具有較長的保留時間,最后被洗脫出來


    SEC排阻法.png

    圖1 尺寸排阻SEC原理圖

    qEV使用步驟(以qEVoriginal產品為例)


    使用qEV尺寸排阻分離柱分離囊泡(外泌體)只需15分鐘。

    1、用PBS沖洗柱。

    2、用移液管將500μl樣品移到柱上。

    3、向分離柱中添加PBS以洗脫囊泡(外泌體)。

    4、按500μl組分收集囊泡(外泌體)。

     


    收集結果展示.png

    圖2 qEV收集結果展示


            用
    qNano系統對qEV收集的囊泡(外泌體)進行定量測量。圖2顯示了從血清樣品中收集的組分的分析。在280納米處用吸光度法測定蛋白質的相對濃度。數據表明,收集的第7至9組分具有最高濃度的囊泡(外泌體),而污染的血清蛋白洗脫的分數為第11至30組分(左圖)。通過比較分離前和分離后的囊泡(外泌體)與蛋白質濃度比,第7組分的囊泡富集量為蛋白質的6000倍(右圖)。根據樣品的不同,如果下游分析分別需要更高的囊泡(外泌體)純度或更高的囊泡(外泌體)產量,可將第7至9部分或第7至11部分匯集在一起。

     qEV產品規格

     

    qEV.png

     

    qEV規格.png

     

    相關文獻


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